荧光定量pcr为什么能够测基因表达差异？ 荧光定量pcr检测是什么

• 荧光定量pcr为什么能够测基因表达差异
• 如何用荧光定量pcr方法比较基因的表达的差异
• 定量pcr基因表达是否具有显著性差异
• 动物实验中，荧光定量PCR检测基因表达时因为老鼠个体差异存在，方差很大，请问这么解决。另外，各位是这么

荧光定量pcr为什么能够测基因表达差异

荧光定量PCR会加入带有荧光基团的探针，探针是能和目的基因结合的单链DNA，如果合成双链DNA后，荧光基团就会激活发光，所以实时检测反应物的荧光强度，反应的就是双链DNA的浓度，由于合成双链DNA的速率和模板浓度有关，所以和参考曲线比较以后是可以计算出模板的相对浓度，当模板是信号RNA是，其反应的就是基因发达的量。

如何用荧光定量pcr方法比较基因的表达的差异

如果扩增效率为1且荧光值相同的完美情况下也是可以比较的，无非就是把一个样品中不同基因当作不同样本中的相同基因来比较，都与这个样品中的内参来做对比。

但麻烦的是，不同基因的扩增效率是不同的，且相同扩增效率下不同基因发出的荧光值也是不同的，所以实际情况下一般不能做比较。

定量pcr基因表达是否具有显著性差异

异基因Differential Gene，是指一个基因在RNA水平处在不同环境压力、时间、空间等方面下，表达有显著性差异的基因。在不同因素下基因突变或者甲基化等结构发生改变导致差异的基因。

从PCR到新一代高通量测序，随着实验技术的不断进步，差异基因开始被越来越多的研究者所关注，医生不再停留在表型和蛋白层面，而是追溯他们的上游对核酸进行挖掘。

动物实验中，荧光定量PCR检测基因表达时因为老鼠个体差异存在，方差很大，请问这么解决。另外，各位是这么

个体的差异如果和实验的差异相当的话...你的数据是不能用的..至少是不可靠的...

可以采用几个不同的内参基因分别做比较看看...如果都是这样的话..那结果就是个体差异而不是实验的..