如果没有合适的酶切位点,如何获得这段基因序列?
如何给一段序列增加一个酶切位点.
你可以设计带有酶切位点的引物,对目的基因进行PCR,就可在目的基因上引入酶切位点.步骤:引物设计(借助软件)——合成引物(公司合成)——PCR.最重要的.
怎么设计带有肠激酶酶切位点的基因序列
只要在蛋白氨基酸序列上加上dddk的序列就可以了.
怎样在序列中插入酶切位点?谢谢了
通过一些软件就可以知道你的序列上的酶切位点情况.通过选择目的基因上没有而载体有的酶切位点就可以把目的基因连接到载体上.
如何知道某一基因内的酶切位点
首先要知道基因序列,然后很多软件(譬如DNAMAN)都可以分析其中酶切位点
已知基因中没有内切酶位点,怎么设计引物
重组时选择你的目的基因上没有,而质粒的多克隆位点上有的酶切位点,一般重组质粒需要两个酶,所以你要选择两个酶切位点,注意尽量避免使用切出平末端的酶.重组引物设计时首先你要确定你选择的两个酶在的酶切位点在质粒的多克隆位点上的排列顺序,这个不能错,不然序列就会接反.一般设计重组引物的时候,在上游引物5'端前面加上载体多克隆位点排列在前面的酶切位点序列,在下游引物5'端前面则加上后面的一个酶切位点,酶切位点加好后,注意5'端还需要加上保护碱基,这个具体你可以去查下内切酶的说明书.然后你要注意,根据你的载体需要,是否要在引物上带上启动子和终止子.
怎么分析酶切位点
看样子你是要做克隆,给你说说我的经验吧,带酶切位点的引物设计:保护碱基(4个)+酶切位点(6或8个)+与模板匹配序列(15-20个).如果是一般的质粒做模板15个配对的绝对没问题,如果是比较复杂的模板,文库一类的,20-25个.保证3'端的5个碱基里有3个是g/c就行.我从来不用软件分析的.pcr时,退火温度就是60度,25个循环.你试试吧,肯定没问题的,我以前设计引物时也是很小心的,用软件分析半天,其实发现没有多大影响的.发卡结构,3'封闭,gc含量,tm值,影响也都不是这么大.纯属经验,希望你的实验有好结果吧
DNAman 怎么分析序列的酶切位点
将待分析的序列装入Channel,点击要分析的Channel,然后通过Restriction/Analysis 命令打开对话框. 参数说明如下: Results 分析结果显示 其中包括: Show summary.
对于一段基因,怎么在其中加入引物并设计酶切位点.
根据需要的酶切位点,设计合适的引物(>20bp),然后PCR克隆,克隆产物就带上了酶切位点
是不是一般在用酶切目的基因使用两个酶直接获得DNA片段?
你的目的基因是什么是你选择的,假如说你要得到某段基因,你要先了解它的序列,看看能用什么限制性内切酶切,然后得到你想要的片段,一般会将其转入载体中扩增的
虚心求教:怎样能知道一个基因中有哪些限制性酶切位点?
这是通过多次重复实验来得到的结果即每次使用不同的限制酶来试验 若基因能表达 既没有切断该基因