怎样评价老师的探究单酶切和双酶切对载体和目的基因的链接课程？

怎么单酶切, 单酶切后 怎么把目的基因连到已经酶切过的载体上.

pcr扩增目的基因时,用限制酶的切取目的基因就可.与载体没有关系.载体是在构建表达载体时才用.限制酶切获取目的基因,一般都用同种限制酶,从外源基因上切两刀即可获取目的基因,多位黏性末端.pcr扩充目的基因时,需要用的是引物.载体是环形基因,用同种限制酶切一刀,插入目的基因即可.

单酶切和双酶切相比有何优缺点

单酶切就是只用一个限制性内切酶去切你的质粒,环状的质粒就成为线状的了,但质粒的大小不变 双酶切用两个限制性内切酶,质粒上就产生了两个缺口,环状质粒就变成两段线状dna了.回收你需要的那一段,因为它的两端和你的目的基因带有互补的黏性末端(当然目的基因也要用这两种酶切才行),在t4dna连接酶在作用下,它们就连到一起了. 你该看看《生物化学》或基因工程方面的书.这都是基本的知识啊.

在基因工程中,用双酶切目的基因和质粒时怎么保证目的基因和载体的定向.

同一种酶切的末端可以相连接在一起,如果质粒的左端和目的基因的左端用同一种酶切,二者的右端用另一种相同的酶切,那么就可以实现定向连接了.

目的基因和质粒定向连接

单酶切和双酶切的区别

单酶切的优缺点

限制酶双酶切的优点

双酶切法的好处

基因工程双酶切的优点

用同一种限制酶切的缺点

基因工程单酶切和双酶切

对于载体的单酶切和双酶切,胶图分别会如何?为什么会这样啊?谢谢帮忙回.

单酶切一个电泳道上会有几个比较亮的带,而且你所根据基因大小所选择的条带内也不一定是你要的.原因是单酶切形成的粘性末端完全相同,就像拼图,除了内容不同,两边完全切合.所以结合方式过多,可能性也多,如质粒和目的基因正确连接,质粒和目的基因反转连接,质粒和质粒连接,目的基因与目的基因的连接.双酶切一般会有3条带,而且正确现象应只有一个是非常亮的.因为两种酶识别两个位点切开,无论是质粒还是目的片段两端的粘性末端完全不同,还是拼图,内容不同,两端切合口也不同,除了一种连接方式外没有其他连接了.胶途中3条带分别为:目的片段条带,空质粒条带,最亮的重组质粒条带.

基因工程使用双酶切和单酶切

双酶切以后目的基因上是有标记基因的,所以看是否有标记基因就能判断是否导入了多余基因.单切酶的话同理,如果是一个切割位点就更没问题了.

基因工程中,载体与载体连接物,目的基因与目的基因连接物,目的.

答案b 点拨:基因工程可将控制特定性状的外源基因导入受体细胞,从而定向改造生物的性状,而且操作过程不受亲缘关系远近的制约,即克服远缘杂交不亲合的障碍.在.

如何正确选用双酶切或单酶切

看载体上的多克隆位点,同时选择在你的目的基因内部没有的酶切位点

设计Ecor I和BamH I双酶切的目的是什么

先说双酶切的目的.双酶切主要是在目的基因两端产生不同的粘性末端,这样在连接的时候目的基因的方向就确定了.如果用同一酶酶切,则两末端的序列是一样的,目的基因可能会反向连接,这样的连接产物是不表达目的蛋白或者表达出的蛋白是无功能的,概率是50%.也就是说,如果用同一酶切,最终会有50%的载体是错误的,这样就大大降低了效率. 至于为什么用ecori和bamhi酶切,有可能是因为这两个酶是相对效率最高、酶切速度最快的酶.当然,也得看实际情况,有可能是载体上只有这两个酶切位点是适用的.

请问酶切时分别单酶切可以切动,而双酶切结果和单酶切相同,是怎么回事啊.

切割肯定是都可以的.只不过是用双酶切的话,链接的时候就跟准确.因为在目的基因和运载体上分别都有两个不同粘性末端的切口,假设为切口1和切口2那么基因在和运载体链接的时候,只能基因上的切口1和运载体上的切口1链接,基因上的切口2和运载体上的切口2链接,这样就保证了基因的顺序.如果只用一种,都是切口1,,那么基因链接时候的顺序是有两种的.

如何将目的基因与已经构建好的载体拼接???

设计引物,引物两端带有设计好的酶切位点,找个有目的基因的细胞,提了ran,然后把目的片段p出来,然后跑胶,试剂盒回收目的片段.把载体和目的片段用同样的双酶切,再跑胶,回收切开的载体和目的片段,连接吧.