细胞冻存的细胞要求 细胞冻存步骤

动物细胞冻存是的细胞数是多少 对数生长期,基本铺满瓶子底(前提是状态很好的细胞),一般来说传代之后2,3天,换液之后就可以冻了,其实这些都是经验,没有说非得多少细胞那么精确

你好!生理盐水,体积视情况而定,保存不要超过2个月 希望对你有所帮助,望采纳.

(转载,仅供参考)1. 37℃水浴预热培养液(huvec-004).2. 从液氮中取出huvec的细胞管,快速将其置入37℃水浴中解冻,直到管中只剩下最后一片结晶(注意:不要.

一、材料(一)仪器 1. 净化工作台 2. 离心机 3. 恒温水浴箱 4. 冰箱(4℃、-. 配制含10%dmso或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液; 2. 取对数生长期的细胞,.

冻存的原则是:慢冻,主要是防止细胞在冷冻过程中形成冰晶,对细胞造成损害,加dmso也是这个原理.复苏细胞的原则是:快融.主要是防止dmso在液体状态下对细胞的毒害作用,快速使细胞进入复苏和生长状态.因此,细胞的冻存与复苏原则应该是慢冻快融.分别经过4度,-20度,-80度和液氮的依次过程进行冻存;经过37度水浴1分钟之内解冻细胞冻存液进行复苏.

1. 配制含10%dmso或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;2. 取对数生长期的细胞,用胰蛋白酶把单层生长的细胞消化下来,悬浮生长的细胞则直接将细胞移至15ml离.

对数生长期,基本铺满瓶子底(前提是状态很好的细胞),一般来说传代之后2,3天,换液之后就可以冻了,其实这些都是经验,没有说非得多少细胞那么精确

细胞冻存 1.取待冻存的细胞用胰酶消化(见相关实验细胞传代培养部分),用培养基将细胞冲洗下来.800 r/min离心5 min,弃上清收集细胞.如果是悬浮生长的细胞,则可直接离心收集细胞. 2.加入适量冻存液(10%甘油+90%培养基,或者10%DMSO+90%培养基)制成细胞悬液.细胞浓度宜大,3*106个/mL左右,并可适量增加牛血清浓度至20%. 3.细胞悬液装入冻存管中.用胶布封裹,做好标记(写上细胞种类、时间及冻存条件等). 4.冻存管在4℃下存放30 min,转放-20℃ 1.5~2 h,再转人-70℃ 4-12 h后即可转移到液氮内(-196℃),注意进行登记.

去百度文库,查看完整内容> 内容来自用户:744410040 培养细胞的冷冻保存与复苏 概述 | 冻存过程 |  冷冻保存与复苏的原理 | 冻存结果 |  冷冻速率 | 讨论 |  .

细胞培养不用血清,冻存可以用无血清冻存液 配方为细胞条件无血清培养基与含10%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基1比1混匀 冻存过程:消化贴壁细胞或收集悬浮细胞,将细胞悬液收集至离心管并1000rpm离心10分钟,弃上清液 用一定量冻存液将细胞重悬,计数并调整细胞密度至100个每毫升左右 将细胞悬液分装至2ml冻存管中,每管1ml并将冻存管口封,贴上标签做好记录 降温: 4度1小时,负20度1小时,负80度18小时或隔夜,液氮