请问设计pcr引物时,用crispor设计出了一段序列后怎么确定上游引物和下游引物呢?
想用PCR扩增下面一段序列,急求高手写出上游引物和下游引物. - 搜.
上游引物:GAATTCacgcgcaaga ttagg(后面可以继续加几个碱基,用PRIMER 5.0看一下,引物设计多少个碱基合适,每个基因序列不同.我用TOYOBO的KOD PLUS的话,就一般引物设计18~22个碱基,一般都能扩增出来) 下游引物: GCGGCCGCccttgggaagaaaaagc(后面可以继续加几个碱基,用PRIMER 5.0看一下,引物设计多少个碱基合适,每个基因序列不同)
高分~~急急求!如果要用PCR扩增下列序列,请写出上游引物和下游.
我估计你是要扩出整个cds的,所以引物设计只能从两端起始,上游:5' atggctgctgaaccagtaga 3' 下游:5' ctagtcttcgttttgaacag 3' 只要模版正确,通过pcr条件优化肯定能扩出以上片段的 你可以按照我给的去合成了, 帮你软件分析了,gc含量退火温度都是可以的
PCR出现只用上游引物就能引出片段的情况!怎么解释
你要看看是不是你的上游引物能在你的模板的下游反向结合,然后两个上有引物拉出的中间的一段.也就是说,出现了错配.你在用PP5设计引物时,一定要注意是否出现了错配、错配可能会拉出的条带大小.有时候PP5会漏判出现错配的情况(这个我发现过很多次了).如果大小类似,建议你测序验证.建议重新设计引物.
PCR引物,网上找到的是一小段DNA序列如图,那么上下游引物怎么.
根据你找到的序列以及其他你所了解到的信息,到NCBI去找更长的序列.下载后再根据序列用primer 5等软件设计引物
让试剂公司合成PCR基因引物时,上游序列与下游序列弄错啦,即把.
名字错了当然没关系,只要序列正确就能用,一般来说,上游引物是正义链5 端开始序列,下游引物是反义链5 端序列从5端开始到3端比对一下,碱基顺序没错的话可以用,换个名字而已.
上游引物和下游引物有什么区别
简单的说上游引物就是和要扩增基因片断上游序列结合的引物,下游引物指与目的基因片断下游序列结合者.上游引物:DNA分子两端不一样,因为核苷酸分子不是对称的.
上游引物和下游引物为什么分别加
分别加只是每个实验室操作习惯而已,上下游引物也可以混合后一起加入PCR体系中,我们实验室就是这样做的
请问PCR引物怎么设计
原发布者:zhuzhenhau93PCR引物设计流程详解本文目的:复制出IL-4基因片段一、查找基因序列1、进入NCBI主页,下拉选框选择Nucleotide,在搜索栏输入要查找的目.
知道引物序列怎么推算扩增片段
用primer blast,输进去上下游,选好种属和扩增对象search不就出来了
我有上下游引物,如何知道我扩增出来的序列是什么?
可以在NCBI上面进行PRIMER的比对 NCBI--BLAST--PRIMER BLAST就可以了哈