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为什么western电泳时两小时全都没跑下来?是电泳液加错了吗? 跑核酸胶时电压达不到

为什么western电泳时两小时全都没跑下来?是电泳液加错了吗?跑核酸胶时电压达不到

western blot 电泳时电压正常,电流很小,跑了2个小时没见跑,什么原因?

首先要看你的电泳液是不是用了很多次了,如果重复应用很多次的话以失去缓冲能力;第二是你的电流可能小了,我刚做的时候也是这样,我当时还是用的100伏的电压,跑不动,而且条带很宽,模糊,后面把电流调到150伏。跑的可快了,而且也压成一个小条带了!

western blot跑不出条带,是什么原因啊?

1、跑胶 电泳Buffer重复利用的时候要注意,不能混浊,有时候能用个3-4次,有时候第二次都不行了,事先前预电泳一下,看看气泡的均匀度;Buffer一定要淹过梳子孔,否则就会发现今天的蛋白不会跑;跑的时候先用低电压跑过浓缩胶,再换高电压跑分离胶,不要追求速度,慢慢跑条带会分离的更好,特别是对于高分子量的目的蛋白;

2、转膜 湿转,Buffer一定要预冷,最好提前一天配好放4度;滤纸不要大过PVDF膜,防止短路;胶在负极,膜靠近正极,放入Tank前检查一遍会使你免以体会放反的痛心疾首;膜要标记好正反面;转膜过程中,经常过去看看,防止意外,如电泳仪接触不好。

顺带一提,步骤一样不一定成功的,有时候是操作不到位所致

为啥我的DNA在琼脂糖凝胶电泳中跑不下来?

一定的电场强度下,DNA分子的这种迁移速度,亦即电泳的迁移率,取决于核酸分子本身的大小和构型,分子量较小的DNA分子比分子量较大的DNA分子迁移要快些,应该是太大了

琼脂糖凝胶电泳没有跑出条带是怎么回事用1%的琼脂糖

琼脂糖凝胶电泳没有跑出条带是怎么回事用1%的琼脂糖

1.首先要排除琼脂糖凝胶配制的是否正确,如果齿孔不规则或残余凝胶颗粒则会使条带不规则;

2.检查电泳槽的电极是否出现移位、歪斜;

3.考虑更换电泳缓冲液;

4.电压不要太高,否则凝胶会受热。

此外,跑出漂亮的琼脂糖电泳照片我有2个经验供参考:

1.琼脂糖凝胶配好后在在槽子里先空跑十几分钟然后断电放置备用;

2.老式槽子放凝胶位置的下方有一水箱,往里充入凉水,电泳时可降低凝胶的温度放置DNA条带变形。