已知一段序列，如何利用多种方法对其进行基因功能验证？ 一段已知目的基因的核苷酸序列

• 基因功能验证有几种方法
• 知道一段DNA序列，请说说用什么方法来知道其功能
• 已知某基因的一段DNA序列，如何克隆该基因？
• 发现某个基因突变位点后，如何检测其对基因功能的影响？

基因功能验证有几种方法

1利用基因重组的技术进行基因敲除

根据目的基因序列设计合成出同源基因片段，利用基因打靶技术将携带同源基因片段的基因打靶载体用电穿孔的技术导入同源的胚胎干细胞中，利用同源基因片段取代靶基因 达到基因敲除的目的。

2筛选出基因打靶成功的细胞

用选择性培养基筛选出基因打靶成功的细胞

3将打靶成功的细胞导入小鼠体内，观察表形。

将打靶成功的细胞导入小鼠囊胚中，再将囊胚导入假孕小鼠体内，然后发育成为基因敲除的小鼠，观察目的基因改变后的小鼠的生物学性状改变，由此达到验证目的基因功能的目的。

知道一段DNA序列，请说说用什么方法来知道其功能

如何确定一段dna序列是一个基因

所谓重叠基因是指两个或两个以上的基因共有一段DNA序列，或是指一段DNA序列成为两个或两个以上基因的组成部分。重叠基因有多种重叠方式。例如，大基因内包含小基因；前后两个基因首尾重叠一个或两个核苷酸；几个基因的重叠，几个基因有一段核苷酸序列重叠在一起，等等。重叠基因中不仅有编码序列也有调控序列，说明基因的重叠不仅是为了节约碱基，能经济和有效地利用DNA遗传信息量，更重要的可能是参与对基因的调控。

已知某基因的一段DNA序列，如何克隆该基因？

用人工合成的方法,就是利用脱氧核糖核苷酸按照DNA序列排列即可.还可以人工合成其RNA再利用互补原则转换成相应的DNA序列.

发现某个基因突变位点后，如何检测其对基因功能的影响？

方法很多

如果这个基因表达蛋白的结构被解析出来的话

可以根据解析出的结构

分析突变是否在蛋白重要的功能位点

实验方法

克隆得到这个基因，

做定点突变得到你需要的突变基因

在细胞中表达

看蛋白在细胞定位有无变化

做coIP看和蛋白相互作用的蛋白有无变化

如果蛋白是个酶的话

看突变前后催化活性的变化

总之，看具体蛋白制定实验

最后最好做一个转基因的小鼠

把突变的基因转到小鼠中

看突变体和野生型的小鼠的不同